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          液相色譜的選購指南
          發布時間:2017-11-21   點擊次數:1529次
            隨著科技的發展,實驗技術的要求,液相色譜儀已經遍布各大高校,研究所,醫院,生化企業實驗室等等。而市場上的液相色譜儀是五花八門,每個儀器的不同部件的性能又是多鐘多樣,相對于時間緊缺的實驗人員來說,也沒有很多精力去逐個挑選甄別。因此在此對液相色譜儀做個簡單分析。
           
            液相色譜儀由包括輸液系統,進樣系統,分離系統,檢測系統,數據處理系統,輸助設備(色譜柱恒溫箱等)幾大部分組成的。但是在機器工作的同時還需要樣本處理設備的支持。只有各個部分都能協調的運作才能發揮出機器的zui佳的性能。因此我們在選擇儀器的時候需要充分考慮到儀器的方方面面才能拿到自己滿意的機器。
           
            首先從常規的幾個部件做個簡單的分析。
           
            (一)輸液泵應具備如下性能:
           
            ① RSD(流量穩定性)<0.3%;
           
            ② 流量范圍寬, 0.1~5.0ml/min內連續可調,有的實驗則需要更大流量;
           
            ③ 輸出壓一般應能達到150~400 kg/cm2,流量越大,zui高壓力越低;
           
            ④ 液缸容積小,有助于減少流動相死體積,利于清洗。
           
            ⑤ 密封性能好,耐腐蝕。
           
            (二)檢測器
           
            ①紫外檢測器,分為可變單波長檢測器VWD和二極管陣列檢測器DAD,可以檢測有紫外吸收的物質
           
            ②熒光檢測器,檢測有熒光的物質
           
            ③視差折光檢測器,通用型檢測器,但對環境要求極為苛刻,而且靈敏度低
           
            ④ELSD,蒸發光散射檢測器
           
            ⑤MSD,質譜檢測器
           
            常用的是紫外檢測,然后是MSD和ELSD
           
            (三)色譜柱
           
            要求柱效高、選擇性好,分析速度快等。目前市場上銷售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、氧化鋁、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達5~16萬/米。
           
            一般的分析只需5000塔板數的柱效;同系物分析500即可;難分離物則可用2萬的柱子。
           
            因此一般10~30cm左右的柱長基本能滿足復雜混合物分析的需要。所以要根據自己實際情況來選擇合適的柱子。
           
            柱效受柱內外因素影響,為使色譜柱達到zui佳效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結構(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術。即使的裝填技術,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應。這種管壁區大約是從管壁向內算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統中,柱外效應對柱效的影響遠遠大于管壁效應。
           
            此外,溫度在色譜分析中是個不容忽視的環境條件,環境溫度對溶劑的溶解能力、色譜柱的性能、流動相的粘度都有影響。而且不同的檢測器對溫度的敏感度不一樣。保持恒定的溫度對實驗而言是個不容忽視的條件,因此也要留意注溫箱的選擇。以保證實驗結果的準確性。
           
            (四)進樣器
           
            進樣裝置要求:密封性好,重復性好,死體積小,保證中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。而且進樣方式多種多樣,可分為隔膜進樣、停流進樣、閥進樣、自動進樣。自動進樣器則是市場發展的趨勢。
           
            (五)數據處理系統
           
            一般專業的液相色譜儀生產廠家都有自己配套的液相色譜儀控制軟件。但有不少液相色譜儀可以使用通用型的色譜數據工作站進行數據計算處理。進口軟件價格比較高,這個自己得根據資金選擇了。
           
            二元泵和四元泵的區別二元有兩個泵,泵后混合,氣體的溶解度隨壓力的增大而增大,所以二元高壓混合不會產生氣泡。四元只一個泵(另外一個是輔泵),是泵前混合,在常壓下進行的,兩種液體混合時,會降低氣體在混合溶液中的溶解度,通常會有氣泡產生,所以四元低壓梯度系統一定要配在線真空脫氣機。
           

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