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          LC液相色譜儀是一類分離與分析技術
          發布時間:2018-06-11   點擊次數:1165次
             LC液相色譜儀是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生了各自的命名,如,紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
            LC液相色譜儀的使用和維護注意事項:
            ①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
            ②應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。
            ③一般說來色譜柱不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
            ④選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。
            ⑤避免將復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。
            ⑥經常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內的雜質。
            ⑦保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置至次日或更長時間。
            ⑧色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進入柱內,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。
            ⑨以硅膠為基質的填料,只能在pH2~9范圍內使用。每次分析檢測完成后,用洗脫能力強的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。
            對LC液相色譜儀的要求
            1、流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。
            2、流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應該恢復到室溫后使用。
            3、不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。
            4、使用緩沖溶液時,做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
            5、長時間不用儀器,應該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
            6、每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進樣器。
            7、C18柱不能進蛋白樣品,血樣、生物樣品。
            8、堵塞導致壓力太大,按預柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
            ①以異丙醇作溶劑沖洗;
            ②放在異丙醇中間用超聲波清洗;
            ③用10%稀硝酸清洗;
            9、氣泡會致使壓力不穩,重現性差,所以在使用過程中要盡量避免產生氣泡。
            10、如果進液管內不進液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進行流動相的清洗。
            11、要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
            12、LC液相色譜儀更換流動相時應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。

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