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          液相色譜儀使用的技術特點
          發布時間:2019-08-23   點擊次數:480次
               液相色譜儀只需要將樣品制成溶液,不受樣品揮發性的影響。流動相選擇范圍廣,固定相數量多,可以分離出熱不穩定、不揮發、不離解、分子量范圍多樣的材料。
           
              在LC液相色譜分析檢測樣品過程中,色譜柱會受到樣品和色譜系統的污染,導致色譜柱耐久性差,使用壽命短。
           
              色譜系統污染主要是指LC液相色譜系統中組分磨損產生的固體顆粒,以及流動相系統沒有完全過濾的固體顆粒。樣品污染主要是指未完全溶解或已完全溶解的樣品進入色譜系統。由于樣品溶劑和流動相溶劑的溶解度不同,被污染的體系被析出。特別是對中藥、天然產物、合成中間體和生物藥物的檢測,由于基質的復雜性,色譜柱的污染將更加嚴重。污染會導致色譜系統壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色,從而帶來檢測成本高、檢測結果不準確等影響。
           
              液相色譜法的發展是一個復雜的過程,但無論多么復雜,也有自己的規律。在方法開發過程中,一般的原則是找到目標化合物的峰,然后調整峰形,再進一步改進。
           
              光譜上的內容主要包括:色譜柱、波長、流動相、溫度、流速和注射量。這意味著如果確定了這些色譜條件,基本上可以認為該方法已經開發成功,所以我們可以通過對這些色譜條件進行逐一檢查來開發該方法。
           
              色譜條件的檢驗是通過色譜中的樣品來進行的,這就要求我們首先建立一個初始條件,即回答從哪里開始的問題。在回答“從哪里開始”這個問題之前,我們需要了解我們的分析對象,就像一場戰爭,我們需要知道我們的敵人是誰,我們需要了解它的物理和化學性質,尤其是化學結構公式是非常關鍵的。
           
              液相色譜儀與樣品預處理技術相結合,具有較高的分辨率和靈敏度,使分離和同時測定性質非常相似的物質成為可能,并可在復雜相中分離痕量成分。隨著固定相的發展,有可能在足夠的條件下分離生物化學物質以保持其活性。
           
              為液相色譜儀的注射口和檢測器類型選擇柱尺寸和墊片材料;避免重復使用氣相色譜儀墊圈;使用合適的刀具(如陶瓷板或金剛石刀)切割立柱;安裝進氣口和檢測器前,確保氣相色譜柱清潔平整。應制造商要求安裝氣相色譜儀,并在進氣口與檢測器之間的適當距離插入色譜柱;氣柱必須置于柱上,毛細管柱的任何部分不得接觸柱壁。確保烘箱內所有接頭在加熱前是水密的,載氣中無氧;通過注射檢查LC柱安裝是否正確,不要保留化合物或使用氣相色譜儀軟件程序,并設置載氣線性流量。
           
             液相色譜儀要求
           
              1、 使用前,流動相必須用液相色譜級試劑進行過濾,去除顆粒雜質和其他物質(過濾膜為0、45m或更細)。
           
              2、 流動相過濾后采用超聲波除氣。脫氣后在室溫下使用。
           
              3、純乙腈不能作為流動相,會導致單向閥卡住,阻止泵進入液體。
           
              4、 使用緩沖液時,樣品完成后立即用去離子水沖洗管道和柱1小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,使離子完全去除。對于柱塞棒的外部,樣品完成后也必須用20mL以上的去離子水沖洗。
           
              5、 不要長時間使用這個儀器。拆下立柱,用插頭密封。注意,由于長霉,鋼瓶不應存放在純水中,而應存放在有機相中(如甲醇等)。
           
              6、 用液相色譜法測定樣品后,用樣品中溶解的溶劑清洗取樣器。
           
              7、 C18柱不能用于蛋白質樣品、血液樣品和生物樣品。
           
              8、 如因堵塞造成壓力過高,可在混合器管道的過濾器單向閥內使用預柱式過濾器進行檢查和清洗。清洗方法:
           
              9、 氣泡會造成不穩定的壓力和較差的重現性,所以在使用過程中盡量避免氣泡。
           
              10、 液相色譜儀如果液管中沒有液體,LC液相色譜儀應使用注射器吸液:注射前應清洗流動相。
           
              11、 注意色譜柱的pH值范圍。不要注入強酸或堿性樣品,特別是堿性樣品。
           
              12、 更換移動相時,濾頭應放置在燒杯內,振動時清洗干凈,再插入新的移動相。不混相流動轉化為異丙醇。
           
              液相色譜系統由儲液器、泵、采樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成。流動相的蓄電池是高壓泵入系統,樣品溶液為流動相,取樣器是流動相在色譜柱(固定相),因為各種組件的示例解決方案兩個階段有不同的分配系數,相對運動的兩個階段,經過幾次的吸附-解吸過程,組件在移動速度的分布有很大的差異,將逸出的成分從柱中分離出來,通過檢測器,將樣品濃度轉換成電信號發送到記錄儀,數據以地圖的形式打印出來。
           
              液相色譜儀的工作原理是流動相累加器是高壓泵入系統,樣品溶液為流動相,取樣器是流動相在色譜柱(固定相),因為各種組件的示例解決方案兩個階段有不同的分配系數,相對運動的兩個階段,經過幾次的吸附-解吸過程中,各組分的分布在運動速度上有很大差別,逸出的組分在色譜柱中分離,通過檢測器,將樣品濃度轉換成電信號發送到記錄儀,數據以地圖的形式打印出來。
           
              LC液相色譜儀不適合溫度環境。正常情況下,在5 ~ 35℃的室溫下即可滿足使用要求。一般來說,濕度環境需要在20%到85%之間。在高濕度地區,使用某些類型的氣相色譜儀時,由于環境濕度高,會降低氣相色譜儀的絕緣性能,工作靈敏度高時響應值也會降低。員工在使用氣相色譜儀時,遇到上述現象應采取必要的措施。只需要將樣品制成溶液,不受樣品揮發性的影響。流動相選擇范圍廣,固定相數量多,可以分離出熱不穩定、不揮發、不離解、分子量范圍多樣的材料。
           
              在LC液相色譜分析檢測樣品過程中,色譜柱會受到樣品和色譜系統的污染,導致色譜柱耐久性差,使用壽命短。
           
              色譜系統污染主要是指LC液相色譜系統中組分磨損產生的固體顆粒,以及流動相系統沒有完全過濾的固體顆粒。樣品污染主要是指未完全溶解或已完全溶解的樣品進入色譜系統。由于樣品溶劑和流動相溶劑的溶解度不同,被污染的體系被析出。特別是對中藥、天然產物、合成中間體和生物藥物的檢測,由于基質的復雜性,色譜柱的污染將更加嚴重。污染會導致色譜系統壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色,從而帶來檢測成本高、檢測結果不準確等影響。
           
              液相色譜儀的發展是一個復雜的過程,但無論多么復雜,也有自己的規律。在方法開發過程中,一般的原則是找到目標化合物的峰,然后調整峰形,再進一步改進。
           
              光譜上的內容主要包括:色譜柱、波長、流動相、溫度、流速和注射量。這意味著如果確定了這些色譜條件,基本上可以認為該方法已經開發成功,所以我們可以通過對這些色譜條件進行逐一檢查來開發該方法。
           
              色譜條件的檢驗是通過色譜中的樣品來進行的,這就要求我們首先建立一個初始條件,即回答從哪里開始的問題。在回答“從哪里開始”這個問題之前,我們需要了解我們的分析對象,就像一場戰爭,我們需要知道我們的敵人是誰,我們需要了解它的物理和化學性質,尤其是化學結構公式是非常關鍵的。
           
              液相色譜與樣品預處理技術相結合,具有較高的分辨率和靈敏度,使分離和同時測定性質非常相似的物質成為可能,并可在復雜相中分離痕量成分。隨著固定相的發展,有可能在足夠的條件下分離生物化學物質以保持其活性。
           
              為液相色譜儀的注射口和檢測器類型選擇柱尺寸和墊片材料;避免重復使用氣相色譜儀墊圈;使用合適的刀具(如陶瓷板或金剛石刀)切割立柱;安裝進氣口和檢測器前,確保氣相色譜柱清潔平整。應制造商要求安裝氣相色譜儀,并在進氣口與檢測器之間的適當距離插入色譜柱;氣柱必須置于柱上,毛細管柱的任何部分不得接觸柱壁。確保烘箱內所有接頭在加熱前是水密的,載氣中無氧;通過注射檢查LC柱安裝是否正確,不要保留化合物或使用氣相色譜儀軟件程序,并設置載氣線性流量。
           
              液相色譜儀要求
           
              1、 使用前,流動相必須用液相色譜級試劑進行過濾,去除顆粒雜質和其他物質(過濾膜為0、45m或更細)。
           
              2、 流動相過濾后采用超聲波除氣。脫氣后在室溫下使用。
           
              3、純乙腈不能作為流動相,會導致單向閥卡住,阻止泵進入液體。
           
              4、 使用緩沖液時,樣品完成后立即用去離子水沖洗管道和柱1小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,使離子完全去除。對于柱塞棒的外部,樣品完成后也必須用20mL以上的去離子水沖洗。
           
              5、 不要長時間使用這個儀器。拆下立柱,用插頭密封。注意,由于長霉,鋼瓶不應存放在純水中,而應存放在有機相中(如甲醇等)。
           
              6、 用液相色譜法測定樣品后,用樣品中溶解的溶劑清洗取樣器。
           
              7、 C18柱不能用于蛋白質樣品、血液樣品和生物樣品。
           
              8、 如因堵塞造成壓力過高,可在混合器管道的過濾器單向閥內使用預柱式過濾器進行檢查和清洗。清洗方法:
           
              9、 氣泡會造成不穩定的壓力和較差的重現性,所以在使用過程中盡量避免氣泡。
           
              10、 如果液管中沒有液體,液相色譜儀應使用注射器吸液:注射前應清洗流動相。
           
              11、 注意色譜柱的pH值范圍。不要注入強酸或堿性樣品,特別是堿性樣品。
           
              12、 更換移動相時,濾頭應放置在燒杯內,振動時清洗干凈,再插入新的移動相。不混相流動轉化為異丙醇。
           
              液相色譜系統由儲液器、泵、采樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成。流動相的蓄電池是高壓泵入系統,樣品溶液為流動相,取樣器是流動相在色譜柱(固定相),因為各種組件的示例解決方案兩個階段有不同的分配系數,相對運動的兩個階段,經過幾次的吸附-解吸過程,組件在移動速度的分布有很大的差異,將逸出的成分從柱中分離出來,通過檢測器,將樣品濃度轉換成電信號發送到記錄儀,數據以地圖的形式打印出來。
           
              液相色譜儀的工作原理是流動相累加器是高壓泵入系統,樣品溶液為流動相,取樣器是流動相在色譜柱(固定相),因為各種組件的示例解決方案兩個階段有不同的分配系數,相對運動的兩個階段,經過幾次的吸附-解吸過程中,各組分的分布在運動速度上有很大差別,逸出的組分在色譜柱中分離,通過檢測器,將樣品濃度轉換成電信號發送到記錄儀,數據以地圖的形式打印出來。
           
              液相色譜儀不適合溫度環境。正常情況下,在5 ~ 35℃的室溫下即可滿足使用要求。一般來說,濕度環境需要在20%到85%之間。在高濕度地區,使用某些類型的氣相色譜儀時,由于環境濕度高,會降低氣相色譜儀的絕緣性能,工作靈敏度高時響應值也會降低。員工在使用氣相色譜儀時,遇到上述現象應采取必要的措施。

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